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耗材專區(qū) EZsepTM MAX固相萃取柱應用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測

更新時間:2024-08-23       點擊次數(shù):1334

前言:

碘醚柳胺鹵化水楊酰苯胺類殺吸蟲藥,可以抑制蟲體線粒體的磷酸化過程,從而阻止蟲體內三磷酸腺甙(ATP)的合成,導致蟲體能量代謝的活力迅速減弱而死亡,隨著國內驅蟲藥的廣泛應用和研究,發(fā)現(xiàn)碘醚柳胺有明顯胚胎毒性,食用含有碘醚柳胺的動物性食品影響身體健康。

本文參照《動物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法(征求意見稿)》,利用EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802凈化樣液,再通過高效液相色譜串聯(lián)質譜儀進行檢測,立了一種對牛奶中碘醚柳胺殘留量進行分析方法。

 

關鍵詞:

牛奶,碘醚柳胺,固相萃取

1 實驗過程

1.1儀器與試劑   

MPREP-SPE08手動固相萃取裝置,貨號:PZ0008北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

E.T.氮吹濃縮儀,貨號:C020017,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

4500質譜系統(tǒng),SCIEX公司;

EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號:PZ12802,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

冷凍離心機,GL-20G-,上海安亭科學儀器廠  ;  

甲醇(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;

乙腈(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;

甲酸、氨水、三乙胺等化學品均為分析純或以上規(guī)格,購自國藥集團化學試劑有限公司。

1.2   工作液配制

碘醚柳胺標準物質:100mg/瓶,購自壇墨質檢標準物質中心。

碘醚柳胺標準儲備液:取碘醚柳胺標準品適量(相當于有效成分約10mg),精密稱取,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為1000μg/mL的碘醚柳胺標準儲備液。

碘醚柳胺標準中間液:移取碘醚柳胺標準儲備液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為10μg/mL的碘醚柳胺標準中間液。

碘醚柳胺標準使用液:碘醚柳胺標準中間液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液。

依次移取0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL,分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度,得到濃度依次為0.2μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L的標準系列工作液

1.3 實驗部分

1.3.1 樣品制備

 取牛奶試樣2g,置于50 mL聚丙烯離心管中,加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液超聲提取10 min,8000 r/min離心5 min,收集上清液至另一50 mL離心管中殘渣中加入8.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液,重復提取一次,合并兩次上清液,用乙腈定容至20 mL,混勻,待凈化。

1.3.2 固相萃取凈化 

EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ128025mL乙腈進行活化,取1.3.1待凈化液5.0 mL上樣,上樣結束后用5mL乙腈淋洗萃取柱,再用5mL 5%甲酸乙腈洗脫萃取柱,收集洗脫液,使用E.T.氮吹濃縮儀45氮氣濃縮至近干,2.0 mL甲醇渦混勻,過微孔濾膜后供LC-MS/MS測定

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜柱:Kinetex Luna PFP(2.6μm,3*100mm)

檢測方式:多反應監(jiān)測(MRM);

流動相:A:0.1%氨水水溶液  B: 甲醇

流速:0.3mL/min

進樣量:5μL

 

表1流動相梯度洗脫表

時間/min

流動相A/%

流動相B/%

0

70

30

5

0

100

8

0

100

8.1

70

30

10

70

30

 

2 實驗結果

耗材專區(qū)  EZsepTM MAX固相萃取柱應用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測 

圖1 標液色譜圖

耗材專區(qū)  EZsepTM MAX固相萃取柱應用于牛奶中碘醚柳胺殘留量的檢測 

2 碘醚柳胺標準曲線

3 結論 

本實驗使用EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802牛奶中碘醚柳胺進行凈化,通過高效液相色譜串聯(lián)質譜儀進行測定,該方法的加標回收率范圍89.6%~95.3%,RSD為2.3%,能夠滿足標準要求。說明EZsepTM MAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802能很好的完成方法中的凈化工作,結果穩(wěn)定、可靠。

參考文獻

[1] 《動物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法(征求意見稿)》


 

 2   加標回收率

加標濃度μg/kg

回收率(%)

均值

RSD

1

2

3

4

5

6

%

%

20

91.6

91.0

89.9

89.6

90.6

95.3

91.3

2.3

 


 


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